Лейкодиф 200 (LDF 200)

Лейкодиф 200 (LDF 200) — набор для приготовления, фиксации и окрашивания мазков крови

Лейкодиф 200 — готовый набор реагентов для быстрого и воспроизводимого окрашивания мазков крови по упрощённому протоколу. Метод предусматривает последовательное погружение предметного стекла в фиксирующий и окрашивающие растворы, что обеспечивает стабильную дифференциацию клеток и позволяет регулировать интенсивность окраски.

Состав набора

1. Фиксирующий раствор (200 мл)

• Метанол — 24 моль/л
• Нафталиновый зелёный — 1 мг/л

2. Окрашивающий раствор 1 (200 мл)

• Эозин Y — 1,73 ммоль/л
• Фосфатный буфер, pH 6,8 — 60 ммоль/л

3. Окрашивающий раствор 2 (200 мл)

• Азур II — 12 г/л
• Фосфатный буфер, pH 6,8 — 60 ммоль/л

4. Таблетки для приготовления промывочного раствора (5 шт.)

• Фосфатный буфер, pH 7,2 — 2,5 ммоль/табл.

Приготовление промывочного раствора

1 таблетку растворяют в 250 мл дистиллированной воды. Готовый раствор стабилен в течение 2 месяцев при +2…+25 °C в защищённом от света месте.

Протокол окрашивания

1. Мазки крови, нанесённые на обезжиренные предметные стёкла, высушивают на воздухе.
2. Реактивы разливают в соответствующие ёмкости для погружения.
3. Фиксация: погрузить мазок в раствор 1 пять раз по 1 секунде; после каждого погружения дать стечь избытку раствора.
4. Эозинофильное окрашивание: трижды по 1 секунде погрузить стекло в раствор 2, позволяя раствору стечь.
5. Базофильное окрашивание: шесть раз по 1 секунде погрузить мазок в раствор 3, удаляя избыток после каждого погружения.
6. Промыть готовый мазок приготовленным буферным раствором и высушить на воздухе.

Важные замечания

1. Интенсивность окрашивания регулируется количеством погружений. Минимум — 3 погружения.
2. Интенсивность эозинофильного оттенка корректируют числом погружений в раствор 2.
3. Для изменения базофильной окраски регулируют количество погружений в раствор 3.
4. Реактивы стабильны, однако должны храниться вдали от прямых солнечных лучей. При изменении цвета рекомендуется их замена. Обычно обновление проводят раз в неделю.
5. При патологических результатах лейкоцитарной формулы рекомендуется повторное окрашивание по методам Май–Грюнвальда и Романовского–Гимзе. Набор Лейкодиф 200 окрашивает гранулы базофилов менее интенсивно. Метод не подходит для детального исследования тромбоцитов.

Меры предосторожности

Фиксирующий раствор содержит метанол — токсичное и легковоспламеняющееся вещество. Во время работы запрещено есть, пить и курить. Необходимо соблюдать правила химической безопасности и использовать СИЗ.

Первая помощь

При отравлении парами — вывести пострадавшего на свежий воздух, при необходимости провести искусственное дыхание. При случайном проглатывании — выпить 0,5 л воды и принять водный раствор пищевой соды (2 ложки или 8 таблеток). При попадании в глаза или на кожу — промыть большим количеством проточной воды. Обязательно обратиться за медицинской помощью.

Утилизация

Все исследуемые материалы следует считать потенциально инфицированными. Их, вместе с остатками реагентов, утилизируют согласно внутренним правилам учреждения. Бумажную упаковку сдавайте в макулатуру, заводскую пластиковую тару — в сортируемый мусор.

Литература

Dobry, E. et al.: Hematologie a transfuzni sluzba, Zdravotnicke actuality 211, Avicenum Praha, 1987.
Hrubisko, M. et al.: Hematologie a krevni transfuse, Vol. I, Avicenum Praha, 1983.